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CCRF-CEM,人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞 消化要有個(gè)度

發(fā)布時(shí)間:2018-06-12瀏覽:1584次

CCRF-CEM,人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞    消化要有個(gè)度

產(chǎn)品代號:CCRF-CEM

中文名稱:人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞

種屬:人

是否鑒定:已鑒定

庫存狀態(tài):現(xiàn)貨

 

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CCRF-CEM,人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞  消化要有個(gè)度

 

細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就細(xì)胞消化而言,多做、善于總結(jié),就可以把細(xì)胞養(yǎng)的越來越好

絕大部分細(xì)胞消化只要用胰酶潤洗一遍即可:

吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。

什么算是消化好了呢?

不需要把細(xì)胞全部消化成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了。

一般能移動(dòng)了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。

細(xì)胞就是*成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。

一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右)是正常的,不要再去延長消化時(shí)間,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。

比較難消化的細(xì)胞:

潤洗方法5min還不能消化,以結(jié)腸癌細(xì)胞為例,比如HCT15、LS411和KM12細(xì)胞,胰酶消化,一般10 cm 培養(yǎng)皿,一次多加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,用胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。

 

常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),受消化影響不是很大:

如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對細(xì)胞代數(shù),對細(xì)胞狀態(tài)要求*。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤洗,都會(huì)對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白。

 

EDTA的作用:

許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,胰酶切割細(xì)胞外基質(zhì)的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于整聯(lián)蛋白的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果10min還消化不*的話),而應(yīng)該想其它辦法。

 

PBS洗滌:

消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因?yàn)檠逯泻幸种埔让傅牡鞍?。對于一些難消化細(xì)胞,可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制胰酶的活性。但對于絕大部分細(xì)胞用胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化,不需要配制不含Ca,Mg離子的溶液。

細(xì)胞代號         細(xì)胞名稱         種屬         鑒定結(jié)果

CCRF-CEM人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞   消化要有個(gè)度

編號 中文名稱  是否鑒定

5637         人膀胱癌細(xì)胞             

7703         人肝癌細(xì)胞         

143B         人骨肉瘤細(xì)胞             

22RV1      人前列腺癌細(xì)胞         

293FT       人胚腎細(xì)胞         

293T         人胚腎細(xì)胞         

435S          人乳腺癌細(xì)胞/人黑素瘤細(xì)胞            

453  人乳腺癌細(xì)胞             

6T-CEM    T細(xì)胞白血病細(xì)胞         

769-P        人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞             

786-O       人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞             

95-D          人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞             

97H  人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞         

A172         人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞         

A2058       人黑色素瘤細(xì)胞         

A2780       人卵巢癌細(xì)胞             

A375         人黑色素瘤細(xì)胞株             

A431         人表皮癌細(xì)胞             

A498         人腎癌細(xì)胞         

A549         人非小細(xì)胞肺癌細(xì)             

A-673        人橫紋肌肉瘤細(xì)胞             

ACHN       人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞             

AGS  人胃腺癌細(xì)胞             

AN3CA     人子宮內(nèi)膜腺癌(轉(zhuǎn)移)細(xì)胞      

ARH-77    人漿細(xì)胞白血病         

ARO 沒有,找不到信息             

ARPE-19   人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞             

B-CPAP     人甲狀腺癌細(xì)胞         

BEAS-2b   人正常肺上皮細(xì)胞             

BEWO       人絨毛膜腫瘤細(xì)胞             

BGC-823  人胃腺癌細(xì)胞(低分化)              

BT-474     人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞             

BT-549     人乳腺管癌細(xì)胞         

BXPC-3     人原位胰腺腺癌細(xì)胞         

C-33 A      人子宮頸癌細(xì)胞         

C643         人甲狀腺癌細(xì)胞         

C8166       T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞        

Ca Ski        人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞/人宮頸癌上皮細(xì)胞       

Caco2       人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞            

CAKI-1      人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞         

cal-27       人舌鱗癌細(xì)胞             

CALU-1     人肺癌細(xì)胞         

CALU-3     人肺腺癌細(xì)胞(胸水)           

CCD-1095SK     人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞             

CCRF-CEM        人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞         

CEM/C1   人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞             

CFPAC-1   人胰腺癌細(xì)胞             

CNE1        人鼻咽癌細(xì)胞            

CNE2        人鼻咽癌細(xì)胞            

COLO 205         人結(jié)腸癌細(xì)胞             

COLO 320DM  人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞             

CW-2        人結(jié)腸腺癌細(xì)胞         

DAOY        Daoy細(xì)胞,具體不清楚            

DAUDI      Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞     

DETROIT 562   人咽頭癌胸水轉(zhuǎn)移細(xì)胞             

DLD-1       人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞             

DU 145     人前列腺癌細(xì)胞         

EA.HY926         人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞             

ECV304    人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞             

ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞            

FADU        人咽鱗癌細(xì)胞             

FTC-133   人濾泡性甲狀腺癌細(xì)胞             

GBC-SD    人膽囊癌細(xì)胞             

GCIY                       

H1299      人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞         

H1395      人肺腺癌細(xì)胞             

H1650      人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞         

H1703      人肺鱗癌細(xì)胞             

H1755      人肺癌細(xì)胞       

H1944      人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞         

H1975      人肺腺癌細(xì)胞             

H2170      人肺鱗癌細(xì)胞             

H226         人肺鱗癌細(xì)胞             

H292         人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移)           

H358         人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞       

H460         人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞            

H520         人肺鱗癌細(xì)胞            

H596         人肺腺鱗癌細(xì)胞         

H661         人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞             

H716         人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞             

H838         人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞         

Hacat       人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞             

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞         

HBL-100   人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞           

HCC1937 人乳腺癌細(xì)胞             

HCC827   人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞         

HCCC-9810      人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞             

HCCLM3  人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞             

HCT-116  人結(jié)腸癌細(xì)胞             

HCT-8       人回盲腸癌細(xì)胞         

HEC-1-A   人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞         

HEC-1-B   人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞         

HEK-293   人胚腎細(xì)胞         

HEL  人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞           

HELA229  人宮頸癌復(fù)蘇細(xì)胞             

Hela-J                    

Hep G2     人肝癌細(xì)胞         

HEP-2       人喉表皮樣癌細(xì)胞            

HEP3B      人肝癌細(xì)胞         

HEY          人卵巢癌細(xì)胞             

HFF  人包皮成纖維細(xì)胞            

HFL1         人胚肺成纖維細(xì)胞             

HFOB1.19         SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞               

HGC-27    人胃癌細(xì)胞(未分化)         

HK-2          人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞             

HL-60        人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞            

HMEC-1   人微血管內(nèi)皮細(xì)胞            

HO-8910  人卵巢癌細(xì)胞             

HPN1                    

HS683       細(xì)胞人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞            

Hs888Lu  人肺成纖維細(xì)胞         

HT-1080   人纖維肉瘤細(xì)胞         

HT-29       人結(jié)腸癌細(xì)胞            

HT-3                       

HTR8        人滋養(yǎng)細(xì)胞         

HUCCT1   膽管上皮癌細(xì)胞              

HuH-6       人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞         

HUH-7      人肝癌細(xì)胞         

HUT78      T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞         

HUVEC-C 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞             

ISK                 

JAR                

JEG-3                     

JEKO-1                   

Jurkat,Clone E6-1              

K-562                     

KATO III                 

KLE                

KTC-1                     

KU812                    

KYSE-150               

LI-7                

LNcap clone FGC                   

L-O2              

LOVO                     

LS 174T                  

MCF10A                

MCF-7                    

MDA-MB-231               

MDA-MB-231(DMEM)                  

MDA-MB-231(L-15)              

MDA-MB-436               

MDA-MB-468               

MG-63                   

MGC-803              

MIA PaCa-2                   

MM.1S                  

MNNG/HOS Cl #5                  

MRC-5                   

MV4-11                 

N87               

NCI-H1299                     

NCI-H1563                     

NCI-H2452                     

NCI-H647                       

NK-92                     

NTHY-ORI-31                

OCM1A                 

OS-RC-2                 

OVCAR-3               

PANC-1                  

PC-3              

PC-3M                   

PC-9              

PLC/PRF/5                      

Raji                

RBE               

RD                 

RKO               

RL95-2                   

RT4               

RWPE-1                 

SAOS-2                   

SH-SY5Y                 

SiHa              

SJCRH30               

SK-BR-3                 

SK-HEP-1               

SK-MES-1              

SK-N-BE(2)                     

SK-NEP-1               

SK-N-SH                 

SK-OV-3                

SPC-A-1                 

SU-DHL-6              

SV-HUC-1                       

SW 1990                

SW1353                     

SW480                   

SW579                   

SW620                   

SW-620                  

SW839                   

SW982                   

T/G HA-VSMC               

T-24              

T47D                      

T82                

T84                

TCA-8113                       

TE 353.Sk                      

TE-1              

THP-1                     

TMK1                     

TPC-1                     

TT                  

TTA1                       

U-118MG                       

U-2 OS                   

U251                      

U87                       

U-87MG                

U-937                     

UM-UC-3              

VCAP                      

WERI-RB-1                     

WI-38                     

WISH                      

WPMY-1                    

ZR-75-1                 

ZR-75-30               

 

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